微生物存在于周圍環(huán)境中，其中一些是致病微生物，從防止感染為起點，醫(yī)療工作者必須嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，對所用物品和工作環(huán)境進(jìn)行消毒滅菌，以確保正常的醫(yī)學(xué)和科學(xué)研究。消毒和滅菌主要是通過物理和化學(xué)因素使微生物的主要代謝發(fā)生障礙，或細(xì)菌蛋白質(zhì)變性凝固，或破壞其遺傳物質(zhì)，導(dǎo)致微生物死亡。 這里主要描述殺滅微生物的物理因素的幾種方法，并相關(guān)設(shè)備的使用。

(一)高壓蒸汽滅菌器

1、構(gòu)造：高壓蒸汽滅菌器是一種雙層金屬圓筒，在兩層之間裝水，外層堅固厚實，部有金屬蓋，蓋旁附有螺旋，用以緊閉蓋門，使蒸汽不能外溢，因此蒸汽壓力增加，并且其溫度也因此增加。

上海三申高壓蒸汽滅菌器上裝有排氣閥門、安全活塞，以調(diào)節(jié)蒸汽壓力。有溫度計及壓力表，以表示內(nèi)部的溫度和壓力。上海三申高壓滅菌器內(nèi)裝有帶孔的金屬擱板，用以放置要滅菌物體。

2、用法：加水至外筒內(nèi)，被滅菌物品放入內(nèi)筒。蓋上滅菌器蓋，擰緊螺旋使之密閉。滅菌器下用煤氣或電爐等加熱，同時打開排氣閥門，排凈其中冷空氣，否則壓力表上所示壓力并非全部是蒸汽壓力，滅菌將不完全。

待冷空氣全部排出后（即水蒸氣從排氣閥中連續(xù)排出時），關(guān)閉排氣閥。繼續(xù)加熱，待壓力表漸漸升至所需壓力時(一般是101.53 kPa，即15磅/英寸2，溫度為121.3℃)，調(diào)解爐火，保持壓力和溫度（注意壓力不要過大，以免發(fā)生意外），維持15~30 min。滅菌時間到達(dá)后，停止加熱，待壓力降至零時，慢慢打開排氣閥，排除余氣，開蓋取物。切不可在壓力尚未降低為零時突然打開排氣閥門，以免滅菌器中液體噴出。

當(dāng)所有冷空氣排出（即，水蒸氣從排氣閥連續(xù)排出）時，關(guān)閉排氣閥。繼續(xù)加熱，直到壓力表逐漸升至所需的壓力（通常為101.53 kPa，或15磅/平方英寸，溫度為121.3℃），調(diào)整火焰，保持壓力和溫度（注意壓力不要太大，以免意外），保持15〜30分鐘。 滅菌時間到達(dá)，停止加熱，直到壓力下降到零，緩慢打開排氣閥，排除剩余氣體，打開蓋子取出物品。在壓力尚未排盡時，不得打開排氣閥，以免上海三申滅菌器中液體噴出。

高壓蒸汽滅菌法為濕熱滅菌法，其優(yōu)點有三：一濕熱滅菌時菌體蛋白容易變性，二濕熱穿透力強，三蒸氣變成水時可放出大量熱增強殺菌效果，因此，它是效果好的滅菌方法。凡耐高溫和潮濕的物品，如培養(yǎng)基、生理鹽水、衣服、紗布、棉花、敷料、玻璃器材、傳染性污物等都可應(yīng)用本法滅菌。

目前已出現(xiàn)全自動電熱高壓蒸汽滅菌器，操作簡單，使用安全。

（二）干熱滅菌器(烤箱)

1、干熱滅菌器由雙鐵板方形金屬盒制成，內(nèi)層外層有絕緣石棉板。大型爐子放置在箱體的下面，或者電線圈安裝在箱體的壁上。內(nèi)壁上有幾個用于空氣循環(huán)的孔，箱前面有鐵門和玻璃門，箱內(nèi)有金屬箱板架數(shù)層。電爐的前部和底部裝有溫度調(diào)節(jié)器以保持所需的溫度。

2、用法：將培養(yǎng)皿，吸管，試管等玻璃包裝設(shè)備放入箱內(nèi)，關(guān)門加熱。當(dāng)溫度升至160〜170℃時，保持溫度2 h，到達(dá)時間，停止加熱，直至溫度自然降至40℃以下，開門前提取，否則冷空氣突然進(jìn)入容易引起玻璃破裂; 空氣溢出傾向于燃燒取出物的皮膚。一般的吸管，管，培養(yǎng)皿，凡士林，液體石蠟等都可以用這種方法滅菌。

（三）紫外線燈的使用

紫外線中波長為240～280nm的具有殺菌能力，其中265～266nm的殺菌作用強。醫(yī)學(xué)上常使用紫外線燈產(chǎn)生紫外線進(jìn)行消毒滅菌。常用的是水銀燈，燈管由石英玻璃制成，管內(nèi)充滿壓強為266 Pa的氬和幾滴水銀。其殺菌作用主要是因為DNA吸收了紫外線引起胸腺嘧啶形成二聚體，從而干擾了DNA的復(fù)制，輕則發(fā)生突變，重則導(dǎo)致死亡。紫外線殺菌力強而穩(wěn)定，但穿透力弱，不能透過普通玻璃和有色紙張，因此，只適用于直接照射的物體表面消毒或空氣消毒。

紫外波長240〜280nm具有殺菌能力，其中265〜266nm殺菌力強。醫(yī)療紫外線光通常用于產(chǎn)生紫外線消毒和滅菌。通常使用的是水銀燈，燈由石英玻璃制成，管內(nèi)填充有266Pa的氬氣和幾滴水銀。其殺菌作用主要是因為DNA吸收了紫外線引起胸腺嘧啶形成二聚體，從而干擾了DNA的復(fù)制，輕則發(fā)生突變，重則導(dǎo)致死亡。紫外線殺菌強而穩(wěn)定，但穿透力弱，不能通過普通玻璃和彩色紙，因此只能直接暴露于物體表面消毒或空氣消毒。

使用方法：將涂有細(xì)菌的平皿放置在距紫外線60～100 cm處，直接受紫外線照射30 min后，37℃孵育24h后觀察生長情況。

結(jié)果：紫外燈管直接照射處無菌生長，如用玻璃和黑紙遮蓋，則有菌生長。

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